Хроматография для гликированного гемоглобина
Содержание статьи
(), . . 2- , 10 , , 16%, . , , , . «» UKPDS (United Kingdom Prospective Diabetic Study). , 1976 1997 . 23 5102 2 , , HbA1c 1% 2 21%, — 37%, — 14% (3). : NGSP IFCC 1,5–2 , . 2007 IFCC, , / / ( — European Association for the Study of Diabetes, EASD), , . , , IFCC , , IFCC ( HbA1c/ Hb), NGSP (%). , , «Average Plasma Glucose Study» HbA1c , “1-derived average glucose” (ADAG).
, , , ; ; , , . () . , , DS-5 Glycomat, Drew Scientific () b1 1, 1b F, C S. . . 5 . , . ( ) « » (Point f are Testing, POCT). , : NycoCard (Axis-Shield), DC2000+ (Bayer), A1cNow (Metrika), TRIstat (Trinity Biotech) . . .
, ( ) b1 . Hb1 . , , , IgG , . Hb1. . Hb1 , (6). (n=20)
(n=20)
(Tosoh A1c 2.2 Plus), (Roche TinaQuant HbA1c II) HbA1% Liquidirect , , Hb1. .
: , , , ; ; (20 ); (10 ). , 150–200 , 1.5 , . . . . , «» , 2009 ( «- » 3-2009) |
Источник
Применение метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения уровня гликированного гемоглобина у больных сахарным диабетом
Сафронова О.Н., Сергеева С.М., Романовская И.О.
Сахарный диабет (СД) — системное заболевание обмена веществ, которое приняло пандемический характер распространения. За последние 30 лет по темпам прироста заболеваемости СД опередил многие инфекционные заболевания, а численность больных СД в мире выросла более, чем в 2 раза и достигла в 2011г 366 млн. человек. В РФ, как и во всех странах мира, отмечаются высокие темпы роста заболеваемости СД, по данным Государственного регистра насчитывается 3,357 млн. больных СД. Самыми опасными последствиями глобальной эпидемии СД являются его системные сосудистые осложнения: ретинопатия, нефропатия, поражение магистральных сосудов сердца, головного мозга, периферических сосудов нижних конечностей. Именно эти осложнения – основная причина инвалидизации и смертности больных СД. Лечение СД направлено на предотвращение, отсрочку, замедление или прекращение развития поздних осложнений.
Диагностика СД, контроль эффективности проводимой терапии не возможны без использования лабораторных методов исследования, среди которых важнейшим в настоящее время признается исследование гликированного гемоглобина.
Гликированный (гликозилированный) гемоглобин (HbAlc) — это соединение гемоглобина с глюкозой, которое образуется в результате неферментативной химической реакции гемоглобина А, содержащегося в эритроцитах, с глюкозой крови. Скорость и объем этой реакции зависят от среднего уровня глюкозы крови на протяжении жизни эритроцита. Таким образом, уровень гликированного гемоглобина отражает гликемию, имевшую место на протяжении периода жизни эритроцита (до 120 суток), т.е. по содержанию гликированного гемоглобина можно судить о том, какой была концентрация глюкозы за предшествующие исследованию 4-8 недель. В связи с этим больным сахарным диабетом рекомендуется проводить исследование уровня гликированного гемоглобина раз в квартал для контроля терапии диабета, и через 4-6 недель после изменения тактики лечения [1]. Существует несколько форм гликированного гемоглобина: HbAla, HbAlb, HbAlc. Последняя форма количественно преобладает и дает более тесную корреляцию со степенью выраженности гипергликемии, поэтому в ходе проспективных исследований DCCT (Diabetes Control and Complications Trial, 1983-1993 гг.) было определено, что из всех вариантов гликированного гемоглобина клинически значимо лишь определение фракции HbAlc [2].
Методы определения гликированного гемоглобина включают в себя электрофорез, иммунные тесты и хроматографию [3]. Учитывая узкий диапазон значений гликированного гемоглобина, по которым оценивается степень компенсации СД, а следовательно, и эффективность проводимой терапии, метод определения гликированного гемоглобина должен удовлетворять следующим требованиям: метод должен быть сертифицирован (сертификат NGSP или IFCC), в процессе анализа должна быть обеспечена возможность прямого определение фракции гликированного гемоглобина HbAlc, внутри- и межлабораторный коэффициент вариации не должен превышать 4 %, исследование должно быть непродолжительным.
Наиболее полно современным требованиям соответствует метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), который используется ведущими лабораториями мира. Метод ВЭЖХ успешно реализован компанией «Био-Рад Лаборатории » в анализаторе D- 10. Компания является мировым лидером в производстве оборудования и наборов реагентов для определения гликированного гемоглобина. Использование анализатора D10 «Био-Рад» позволяет обеспечить необходимую воспроизводимость результатов определения HbА1с: коэффициент вариации составляет 1,5-2,0%. Анализатор имеет сертификат NGSP, эта программа предлагает стандарты, руководствуясь рекомендациям DCCT (Diabetes Control and Complication Trial). Анализатор D-10 снабжен встроенной системой контроля качества. Применение контроля позволяет обеспечить высокий уровень автоматизации. Для проведения анализа может быть использована как венозная, так и капиллярная крови. Время одного анализа составляет 3 минуты.
В нашей лаборатории накоплен значительный опыт по исследованию уровня гликированного гемоглобина с использованием анализатора D-10 компании Био-Рад. Анализатор позволяет определять процент HbА1с в цельной крови человека с помощью ионообменной высокоэффективной жидкостной хроматографии. При этом происходит автоматическое разведение пробы, инъекция пробы в аналитический картридж, где создается запрограммированный буферный градиент возрастающей концентрации ионов, благодаря которому осуществляется разделение гемоглобинов на основе их ионных взаимодействий с материалом картриджа. Затем разделенные гемоглобины проходят через проточную ячейку фотометра, где происходят измерения изменений поглощения при длине волны 415 нм. Результат исследования выдается в виде хроматограммы, на которой четко видны различные варианты гемоглобина, каждый из которых имеет свой собственный пик (рис.1). Рассчитывается площадь и процентное содержание гемоглобина А1с. Результаты не требуют дальнейших пересчетов, в то время как результаты определения HbA1c, полученных на анализаторах, ориентированных на стандарты IFCC, должны быть пересчитаны по специальной формуле. В работе используются калибраторы и контрольные материалы фирмы Био-Рад. Внутрилабораторный контроль качества проводится в каждой аналитической серии по двум уровням аттестованных контрольных образцов. Участие в системе внешнего контроля качества РФ ФСВОК позволяет получить оценку по следующим параметрам: повторяемости (внутрисерийной вариации), воспроизводимости.
Рис. 1. (междневной) и правильности.
Проведение исследования уровня НbА1с в представляемых ФСВОК образцах (по 2 в каждом цикле из двух ежегодных) показало, что полученные нами данные во всех случаях входили в диапазон допустимых для метода ВЭЖХ. Практическое использование методики в клинико-диагностической лаборатории ЦП ОАО «РЖД» начато в 2009 году. Определение уровня гликированного гемоглобина проводилось у пациентов, направленных на анализ эндокринологами поликлиники. Объем исследований неуклонно возрастал. (табл.1).
Таблица 1
| Годы | Число выполненных исследований HbA1c | %% к предыдущему году |
| 2009 | 673 | — |
| 2010 | 1267 | 188 |
| 2011 | 1676 | 132 |
При этом более чем у половины пациентов (59% случаев) уровень HbA1с был выше 6%.
Интерпретация результатов определения уровня HbA1с у пациентов проводилась с учетом современных представлений о клинической значимости метода. В 2011 году ВОЗ одобрила возможности использования гликозилированного гемоглобина для диагностики СД. В качестве диагностического критерия выбран уровень HbA1c > 6,5%, нормальным считается уровень HbA1c до 6,0%. Вместе с тем, базируясь на международном и отечественном опыте лечения СД, включая рекомендации IDF 2005; AACE 2009; ISPAD 2009; РАЭ2011, внесены изменения в тактику ведения пациентов при сахарном диабете 1 и 2 типа. Согласно этим изменениям, выбор индивидуальных терапевтических целей основывается на значениях уровеня HbA1c, который расценивается в зависимости от возраста пациента, ожидаемой продолжительности жизни, риска тяжелой гипогликемии и наличия поздних микро- и макрососудистых осложнений. (табл. 1).
Таблица 1
| Возраст | |||
| Молодой | Средний | Пожилой и/или ОПЖ<5 лет | |
Нет тяжелых осложнений и/или риска тяжелой гипогликеми | <6,5% | <7,0% | <7,5% |
Есть тяжелые осложнения и/или риск тяжелой гипогликемии | <7,0% | <7,5% | <8,0% |
Таким образом, результаты теста помогают врачу выработать тактику ведения пациента, т.к. определение HbA1c позволяет судить об уровне глюко- зы в крови за последние 6-8 недель.
Поддержание уровня гликированного гемоглобина в крови на близких к норме значениях помогает снизить частоту сосудистых осложнений СД или замедлить их прогрессирование, т.е. сохранить на более длительное время трудоспособность больных.
Список литературы:
- Diabetes, «Hemoglobin A1c as an Indikator of the Degree of Glucose Intolerance in Diabetes», 25(3):230-2, 1976.
- Алгоритмы специализированной медицинской помощи больным сахарным диабетом (издание второе). М.,2006.
- Ильин А.В. Уровень гликированного гемоглобина – ключевой параметр контроля в лечении сахарного диабета и профилактике его осложнений. Лаборатория. 1,2008.
Источник
Гликированный гемоглобин и его норма
Гликированный гемоглобин – это один из показателей биохимического анализа крови. Позволяет выявить среднее значение уровня сахара в крови за последние три месяца. В анализах может обозначаться как HbA1C или A1C.
Содержание:
Кому и как часто нужно сдавать кровь на гликированный гемоглобин
Какой уровень HbA1C считается нормой
Как правильно сдавать анализ на гликированный гемоглобин
Знать его значение важно для того, чтобы своевременно выявить сахарный диабет,контролировать течение заболевания и эффективность применяемой терапии.
Кому и как часто нужно сдавать кровь на гликированный гемоглобин
Исследование крови на гликированный гемоглобин дает основные сведения о состоянии и намного удобнее иных анализов, позволяет выявить несоблюдение режима питания и плохой контроль сахара со стороны пациента.
Результат выражается в процентах. Например, уровень может быть 6,5%. Цифра показывает долю гемоглобина, соединившегося с глюкозой, то есть гликированного. Токсины, образующиеся в результате реакции в избытке, дают осложнения на почки, органы зрения и нижние конечности. Оставшиеся 93,5% вещества остаются свободными и продолжают доставлять кислород в ткани.
Для выявления гестационного диабета у беременных не подходит, так как показывает повышение сахара с опозданием. Анализ показан женщинам, планирующим рождение ребенка.
Всем здоровым людям по достижении 45 лет измерять показатель гликированного гемоглобина достаточно один раз в три года. Это позволит выявить диабет II типа на ранней стадии.
До 45 лет регулярная сдача анализа нужна при нахождении в группе риска:
По ожирению или нахождению на учете по излишней массе тела.
При малоподвижном образе жизни.
Если среди близких родственников есть страдающие сахарным диабетом.
При обнаружении толерантности к глюкозе или уровне гликированного гемоглобина более 5,7%.
При наличии диагноза артериальная гипертензия.
Если в период беременности был гестационный диабет.
Присутствует уменьшение чувствительности к инсулину.
При высоком риске развития сахарного диабета сдавайте анализ на установление уровня гликированного гемоглобина не режеодного раза в год.
При хорошо контролируемом течении, когда показатель удается удерживать на уровне не более 7%, анализ сдают раз в 6 месяцев.
На начальных этапах терапии и при изменении схемы лечения HbA1C контролируют ежеквартально.
Лицам старше 60 лет нужно сдавать анализ ежегодно, а при ухудшении зрения и общего самочувствия, подозрении на сахарный диабет – безотлагательно.
Какой уровень HbA1C считается нормой
Официальные нормы показателя одинаковы как для мужчин, так и для женщин. Не зависит он и от возраста с небольшими исключениями.
Нормальнымсчитается уровень гликированного гемоглобина до 5,7%. Лучшим считается показатель 5,5%.
Нахождение результата в диапазоне 5,7%-6,4% свидетельствует о риске развитиясахарного диабета II типа. В данном случае важно принять меры для снижения вероятности заболеть, проконсультироваться у врача. При уровне до 6% обязателен переход на низкоуглеводную диету.
Показатель 5,6-5,9% считается слегка повышенным, какие-либо симптомы нарушения обмена углеводов отсутствуют, но может присутствовать лишний вес.
При уровне HbA1C в пределах 6,1-6,4% некоторые специалисты уже ставят диагноз пред диабет и назначают лечение. Если пустить развитие болезни на самотек, то в течение 6-10 лет появятся проблемы с почками, зрением и ногами. Риск смерти от сердечно-сосудистого заболевания в таком случае повышается на 25%. Преддиабетическое состояние требует перехода на здоровый образ жизни.
По результату анализа, показавшему HbA1C более 6,5% возможен сахарный диабет, но требуются дополнительные исследования для подтверждения диагноза. Как правило, он подтверждается. Цифра 6,5-7,5% свидетельствует о патологии средней тяжести.
Для лиц с сахарным диабетомрекомендовано поддерживать показатель на уровне до 7%. Однако удерживание цифры в пределах 5,5-5,7% продлит жизнь и поможет избежать инвалидности.
Показатель от 8% свидетельствует о плохом контроле и стремительном развитии осложнений, вплоть до потери сознания и комы.
Установление и поддержание HbA1C в норме важно для снижения развития опасных осложнений:
Инфаркта и инсульта.
Диабетической ретинопатии или нейропатии, поражения почек.
У детей с сахарным диабетом желательно поддерживать показатель гликированного гемоглобина на уровне 5,4% до подросткового периода. Цифра 4-5,9% свидетельствует, что болезни нет. 6-7% — течение заболевания контролируется хорошо. При показателе от 7,1% фиксируется тяжелое состояние.
Как правильно сдавать анализ на гликированный гемоглобин
От пациента не требуется особой подготовки перед походом в лабораторию. Данный анализ необязательно сдавать натощак, можно перекусить и попить воды. Кровь берут из вены, а результат выдают на следующий день.
Если анализ сдается для выявления всех биохимических параметров крови, то принимать пищу перед сдачей не следует.
Чтобы получить достоверный результат, сдавайте кровь на исследование в независимой лаборатории, которая занимается диагностикой, но не лечением, и заинтересована в честном результате.
На показатель гликированного гемоглобина влияют имеющиеся заболевания и состояния, об их наличии в обязательном порядке нужно сообщить врачу на приеме.
Цифра может получиться завышеннойпри железодефицитной анемии. Занизитьреальный уровень могут:
кровотечения, которые были недавно или возникают периодически;
недавнее переливание крови;
некоторые болезни, например, гемолитические анемии различного генеза.
К сожалению, на протяжении длительного периода гликированный гемоглобин может быть выше нормы, но без проявления симптомов. Поэтому важно регулярно сдавать кровь на анализ и поддерживать показатель на уровне 5,5-5,7% как женщинам, так и мужчинам любого возраста.
Официальная медицина не признает опасность результата в пределах 6%. Но людям, желающим прожить дольше, лучше начинать лечение диабета в легкой форме. Результат свыше 6,5% дает право врачу ставить точный диагноз.
Источник
Гликированный гемоглобин (HbA1c)
[06-014]
Гликированный гемоглобин (HbA1c)
635 руб.
Гликированный гемоглобин (A1c) – специфическое соединение гемоглобина эритроцитов с глюкозой, концентрация которого отражает среднее содержание глюкозы в крови за период около трех месяцев.
Синонимы русские
Гликогемоглобин, гемоглобин A1c, HbA1c, гликозилированный гемоглобин.
Синонимы английские
Glycated hemoglobin, hemoglobin A1c, HbA1c, glycohemoglobin, glycosylated hemoglobin.
Метод исследования
Ионообменная высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ).
Единицы измерения
% (процент).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
- Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Анализ на гликированный гемоглобин (A1c) помогает оценить среднее содержание глюкозы в крови за последние 2-3 месяца.
Гемоглобин – это находящийся внутри красных кровяных клеток (эритроцитов) белок, переносящий кислород. Существует несколько типов нормального гемоглобина, кроме того, идентифицировано много аномальных разновидностей, хотя преобладающая форма – это гемоглобин А, составляющий 95-98 % от общего гемоглобина. Гемоглобин А подразделяется на несколько компонентов, один из которых А1с. Часть циркулирующей в крови глюкозы спонтанно связывается с гемоглобином, образуя так называемый гликированный гемоглобин. Чем выше концентрация глюкозы в крови, тем больше образуется гликированного гемоглобина. Соединившись с гемоглобином, глюкоза остается «в связке» с ним до самого конца жизни эритроцита, то есть 120 дней. Соединение глюкозы с гемоглобином А называется HbA1c или A1c. Гликированный гемоглобин образуется в крови и исчезает из нее ежедневно, поскольку старые эритроциты погибают, а молодые (еще не гликированные) занимают их место.
Тест на гемоглобин A1c применяется для контроля за состоянием пациентов, которым поставлен диагноз «сахарный диабет». Он помогает оценить, насколько эффективно идет регулирование уровня глюкозы в процессе лечения.
Некоторым пациентам анализ на гемоглобин A1c назначают для диагностики диабета и преддиабетического состояния дополнительно к тесту на глюкозу в плазме крови натощак и тесту на толерантность к глюкозе.
Полученный показатель измеряется в процентах. Пациентам, страдающим диабетом, необходимо стремиться удерживать уровень гликированного гемоглобина не выше 7 %.
A1c следует указывать одним из трех способов:
- в процентах от общего количества гемоглобина,
- в ммоль/моль, согласно Международной федерации клинической химии и лабораторной медицины,
- как среднее содержание глюкозы мг/дл или ммоль/л.
Для чего используется исследование?
- Для контроля за глюкозой у больных сахарным диабетом – для них поддержание ее уровня в крови как можно ближе к норме очень важно. Это помогает минимизировать осложнения на почки, глаза, сердечно-сосудистую и нервную системы.
- Чтобы определить среднее содержание глюкозы в крови пациента за несколько последних месяцев.
- Чтобы подтвердить правильность принятых для лечения диабета мер и выяснить, не требуют ли они корректировок.
- Для определения у пациентов с недавно диагностированным сахарным диабетом неконтролируемых подъемов глюкозы в крови. Причем тест может назначаться несколько раз до тех пор, пока не будет выявлен желаемый уровень глюкозы, затем его требуется повторять несколько раз в год, чтобы убедиться, что нормальный уровень сохраняется.
- В профилактических целях, чтобы диагностировать сахарный диабет на ранней стадии.
Когда назначается исследование?
В зависимости от типа диабета и от того, насколько хорошо болезнь поддается лечению, тест на А1с проводится от 2 до 4 раз в год. В среднем пациентам с сахарным диабетом рекомендуется сдавать анализ на А1с дважды в год. Если диабет у пациента диагностирован впервые или контрольное измерение прошло неудачно, анализ назначается повторно.
К тому же данный анализ назначается, если у пациента подозревается диабет, поскольку есть симптомы повышенного содержания глюкозы в крови:
- сильная жажда,
- частое обильное мочеиспускание,
- быстрая утомляемость,
- ухудшение зрения,
- повышенная восприимчивость к инфекциям.
Что означают результаты?
Референсные значения: 4,27 — 6,07 %.
Чем ближе уровень А1с к 7 % у пациента, страдающего диабетом, тем легче контролировать болезнь. Соответственно, с повышением уровня гликированного гемоглобина повышается и риск осложнений.
Результаты анализа на А1с интерпретируются следующим образом.
Показатель гликированного гемоглобина | Значение |
4-6,2 % | У пациента нет диабета |
6,5 % и больше | Пациент болен сахарным диабетом |
5,7-6,4 % | Преддиабет (нарушение толерантности к глюкозе, связанное с повышенным риском диабета) |
Согласно клиническим рекомендациям МЗ РФ ОО «Российской ассоциации эндокринологов» «Алгоритмы специализированной медицинской помощи больным сахарным диабетом» (2019 г.), дополнительным диагностическим показателем принят среднесуточный уровень глюкозы плазмы (ССГП) за последние три месяца и его корреляция с уровнем HbA1c.
Что может влиять на результат?
У пациентов с аномальными формами гемоглобина, например у больных с серповидными эритроцитами, уровень гликированного гемоглобина будет занижен. Кроме того, если человек страдает анемией, сильными кровотечениями, результаты анализа у него тоже могут быть заниженными. Напротив, завышенными показатели А1с бывают при недостатке железа и при недавно перенесенном переливании крови (так как жидкие консерванты крови содержат высокую концентрацию глюкозы).
Важные замечания
Анализ на А1с не отражает резкие перепады содержания глюкозы в крови. Колебания глюкозы у пациентов с лабильным диабетом тоже не будут выявлены данным тестом.
Также рекомендуется
- Глюкоза в плазме
- Глюкозотолерантный тест
- Фруктозамин
Кто назначает исследование?
Терапевт, эндокринолог.
Источник