Изоэлектрическая точка гемоглобина 6 8

2.14 Дан фрагмент пентапептидной цепи: серил-лизил-лейцил-цистеил-валин.

Выберите аминокислоты, которые могут участвовать в образовании:

2.15 Определите, как будут вести себя при электрофорезе в нейтральной среде следующие аминокислоты:

2.16 Какие из перечисленных факторов могут изменять конформацию белковой молекулы:

2.17 Какие свойства белка обусловлены наличием в их структуре карбоксильных и аминогрупп?

1.  гидрофильность и агрегативная неустойчивость;

2.  термолабильность и растворимость;

3.  способность к электрофорезу и реакциям осаждения;

4.  амфотерность и способность к электрофорезу.

2.18 Для изучения первичной структуы белка применяется метод:

1.  секвенирования;

2.  рентгеноструктурного анализа;

3.  определение коэффициента поступательного трения;

4.  определение характеристической вязкости.

2.19 Какова особенность кислых белков?

1.  преобладание дикарбоновых аминокислот;

2.  равное соотношение диаминомонокарбоновых и моноаминодикарбоновых аминокислот;

3.  преобладание диаминомонокарбоновых кислот;

4.  белок состоит из моноамино — и монокарбоновых кислот.

2.20 Белки характеризуются:

1.  амфотерными свойствами;

2.  отсутствием специфической молекулярной организации;

3.  сохранением структуры молекулы при кипячении;

4.  неспособностью кристаллизоваться.

2.21 Первичная структура белка – это:

1.  конфигурация полипептидной цепи;

2.  способ укладки полипептидной цепи в определенном объеме;

3.  порядок чередования аминокислот в полипептидной цепи;

4.  количественный состав аминокислот в полипептидной цепи.

2.22 Вторичная структура – это:

1.  альфа-спираль, бета-складчатость и аморфные участки;

2.  конфигурация полипептидной цепи;

3.  образование протомера;

4.  способ взаимодействия нескольких протомеров в пространстве.

2.23 Третичная структура белка – это высшая ступень организации для:

1.  олигомерных белков;

2.  мономерных белков;

3.  доменных белков.

2.24 Связи, стабилизирующие α-спираль:

1.  водородные;

2.  гидрофобные;

3.  пептидные;

4.  ионные.

2.25 Что такое лиганд?

1.  мономер четвертичного белка;

2.  часть молекулы протомера, выполняющая определенную функцию;

3.  скопление гидрофобных аминокислот на поверхности белка;

4.  молекула или ион, которые связываются с белком.

2.26 Что такое кластер?

1.  скопление радикалов на поверхности белка, выполняющих функцию связывания;

2.  мономер четвертичного белка;

3.  небелковая часть сложного белка;

4.  часть молекулы протомера, выполняющая определенную функцию.

2.27 Домен – это:

1.  часть протомера, участвующая в функции связывания;

2.  мономер четвертичного белка;

3.  часть протомера, выпоняющая сходные функции в разных белках;

4.  небелковая часть сложного белка.

2.28 Четвертичная структура – это:

1.  пространственная укладка протомера;

2.  пространственная укладка нескольких протомеров;

3.  α-спираль и β-структура;

4.  образование доменов.

2.29 Нативные свойства олигомерных белков проявляются при формировании:

1.  α-спирали;

2.  четвертичной ступени организации;

3.  β-структуры;

4.  третичной ступени организации.

2.30 Взаимодействие субъединиц в олигомерном белке осуществляется за счет:

1.  всех типов слабых связей;

2.  только ковалентных связей;

3.  только гидрофобных связей;

4.  ионов металлов.

2.31 Нативные свойства мономерных белков проявляются при формировании:

1.  α-спирали;

2.  третичной структуры;

3.  полипептидной цепи;

4.  четвертичной структуры;

5.  вторичной структуры.

2.32 Скорость седиментации белка зависит от:

1.  числа растворенных молекул;

2.  формы молекулы белка;

3.  ионной силы раствора;

4.  величины молекулы и ее массы.

2.33 Изоэлектрическая точка гемоглобина равна 6,8. Куда мигрирует данный белок в среде с рН=3,0 при электрофорезе?

1.  мигрирует к катоду;

2.  остается на линии старта;

3.  образует биполярный ион;

4.  мигрирует к аноду.

2.34 Обратимая денатурация белка происходит при:

1.  длительном нагревании;

2.  действии сильных кислот;

3.  кратковременном воздействии спирта;

4.  добавлении солей тяжелых металлов.

2.35 При денатурации белка происходит:

1.  изменение пространственной организации молекулы;

2.  связывание ионогенных групп;

3.  сохранение конформации белка.

2.36 Необратимая денатурация происходит при:

1.  высаливании;

2.  кратковременном воздействии спирта;

3.  действии сильных кислот;

4.  воздействии постоянного электрического поля.

2.37 Представителями хромопротеинов являются:

1.  цитохромы;

2.  каталаза;

3.  гемоглобин;

4.  миоглобин;

5.  хлорофилл;

6.  рибофлавин.

2.38 Какой заряд имеет белок в ИЭТ?

1.  положительный;

2.  отрицательный;

3.  электрически нейтрален;

4.  любой.

2.39 Как будет мигрировать белок при проведении электрофореза в условиях, когда pH раствора имеет более щелочное значение, чем ИЭТ?

1.  к аноду;

2.  к катоду;

3.  остаётся на месте старта;

4.  образует биполярный ион.

2.40 Что является простетической группой гемоглобина?

1.  четыре пиррольных кольца, соединённых с железом;

2.  протопорфирин;

3.  железосодержащий протопорфирин.

2.41 Какой метод можно применить для фракционирования белков?

1.  кристаллизацию;

2.  осаждение кислотами и щелочами;

3.  электрофорез;

4.  высаливание.

2.42 Укажите суммарный заряд в нейтральной среде для тетрапептида

глицил-аспарагил-лизил-гистидин:

1.  положительный;

2.  отрицательный;

3.  нейтральный.

2.43 Укажите направление движения пептида лиз-гли-ала-лей в процессе электрофореза на бумаге при pH=7.0:

1.  к катоду;

2.  к аноду;

3.  останется на старте.

2.44 Какой процесс сопровождается потерей белком гидрофильных и приобретением гидрофобных свойств:

1.  гидролиз;

2.  денатурация;

3.  диссоциация;

4.  седиментация.

2.45 Специфичность белков обусловлена:

1.  аминокислотным составом, их чередованием;

2.  содержанием α-спирализованных и β-складчатых участков;

3.  наличием определённых кластеров;

4.  наличием небелкового компонента.

2.46 Укажите аминокислоты, радикалы которых имеют при pH=7.0 отрицательный заряд:

1.  лизин;

2.  серин;

3.  треонин;

4.  глутаминовая кислота;

5.  аргинин;

6.  аспарагин.

2.47 О чём позволяет судить биуретовая реакция:

1.  о наличии белков в биологической жидкости;

2.  о первичной структуре белка;

3.  о наличии аминокислот в белке;

4.  о функциях белков.

2.48 Из приведённых ниже аминокислот выберите те, радикалы которых могут участвовать в образовании водородных связей:

1.  аспарагиновая кислота;

2.  глицин;

3.  глутаминовая кислота;

4.  серин;

5.  валин;

6.  лизин;

7.  гистидин.

2.49 Выберите пары аминокислот, способные образовывать связи при формировании третичной структуры белка:

1.  серин, аланин;

2.  аланин, валин;

3.  глутамин, аспарагиновая кислота;

4.  цистеин, цистеин;

5.  гистидин, аспарагиновая кислота;

6.  фенилаланин, аргинин;

7.  цистеин, аланин;

8.  глутаминовая кислота, лизин.

2.50 Что представляют собой контактные поверхности протомеров в олигомерном белке:

1.  поверхностные участки протомеров, между аминокислотными остатками которых образуются преимущественно ковалентные связи;

2.  поверхностные участки протомеров, комплементарные друг другу, в результате пространственного и химического соответствия между двумя поверхностями образуется большое количество слабых связей;

В кислой среде, когда в результате избытка водородных ионов подавлена ионизация карбоксильных групп, молекула белка ведет себя как основание, приобретает положительный заряд и при электрофорезе движется к катоду. В щелочной среде, наоборот, подавлена ионизация аминогрупп, и молекула белка ведет себя как кислота и при электрофорезе передвигается к аноду. В изоэлектрическом состоянии свойства растворов белков резко меняется: при этом они имеют, наименьшую вязкость, плохую растворимость. При значении рН, близком к изоэлектрической точки, разноименно заряженное группы -NH3+ и COO- притягиваются друг к другу и нить закручивается в спираль. Молекулы ВМС в развернутом состоянии придают растворам более высокую вязкость, чем молекулы ВМС, свернутые в спираль или клубок.

Гидрофильность растворов ВМС. Одно из важнейших свойств высокомолекулярных соединений — гидрофильность. Гидрофильность искусственных полимеров обусловлена двойными связями, аминными и спиртовыми группировками.

Гидрофильность природных полимеров обусловлена главным образом пептидными, эфирными, двойными связями, карбоксильными, карбонильными, спиртовыми и аминными группами. Различают диссоциированные [ионогенные] гидрофильные группы и недиссоциированные [полярные] группы.

Ионогенные гидрофильные группы: R—СООН, R—СООNa, R—NН3ОН, R—NH3Cl.

Диссоциация ионогенных групп обеспечивает ВМС электрический заряд, а полярные группы притягивают диполи воды, образующие гидратную оболочку. Именно это и делает растворы биополимеров устойчивыми к коагулирующему действию электролитов. Итак, устойчивость растворов ВМС определяется двумя факторами: наличием заряда и наличием гидратной оболочки, причём главным фактором является водная оболочка. Она препятствует коагуляции даже в изоэлектрическом [электронейтральном] состоянии. Образование третичной и четвертичной

структуры у белков не случайно — при такой укладке все гидрофильные группы находятся снаружи.

Примеры решения задач

Пример 1.

Какой заряд имеют альбумины (pI=4,9) и глобулины (pI=7) в крови.

Решение:

рН крови в среднем 7,36, так как изоэлектрическая точка ниже заряд белки имеют отрицательный, причем альбумины имеют заряд ниже, чем глобулины.

Пример 2.

При рН=6,0 инсулин при электрофорезе остается на старте. К какому электроду инсулин будет перемещаться в 0,1 М растворе соляной кислоты?

Решение:

ИЭТ инсулина равна 6,0, т.е. белок не имеет заряда. рН (НСI) = — lgC(H+ ) = — lg10-1 =1. В кислой среде инсулин будет иметь заряд (+), следовательно инсулин будет передвигаться к катоду.

Пример 3.

Изоэлектрическая точка белка миозина равна 5,0. При каких значениях рН: 2,4,5 или 7 электрофоретическая подвижность будет наибольшей?

Решение:

При рН=2 и при рН=4 происходит ионизация -NH2 , причем при рН=2 — в большей степени. При рН=5 ионизация отсутствует, электрофоретическая подвижность не наблюдается. При рН=7 происходит ионизация групп –СООН. Наибольшая электрофоретическая подвижность миозина наблюдается при рН=2, так как разность между значением ИЭТ и рН буферного раствора максимальна, частица белка имеет при этом наибольший положительный заряд.

Задачи для самостоятельного решения

1. К какому электроду будут передвигаться частицы белка (рI =4,0) при электрофорезе в ацетатном буфере, приготовленном из 10 мл раствора ацетата натрия с концентрацией 0,1 моль/л и 50 мл 0,2 моль/л уксусной кислоты (рКкислоты =4,76)?

2. Будет ли происходить набухании е желатины (рI=4,7) в ацетатном буфере, приготовленном из 10 мл ацетата натрия и 100 мл уксусной кислоты (одинаковых концентраций) (рК=4,76).

3. Изоэлектрическая точка пепсина желудочного сока равна 2,0. Как будет заряжен этот белок при нормальной кислотности желудочного сока взрослого человека. Ответ поясните.

4. В двух пробирках раствор белка, имеются два электролита : сульфат натрия и хлорид свинца. Какой из электролитов необходимо добавить для осаждения белка без нарушения структуры? Каков механизм осаждения белков при использовании этих электролитов?

5. Назовите и опишите реакции осаждения белка, применяемые в клинике. Почему эти реакции наиболее надёжны?

6. К какому электроду будут передвигаться при электрофорезе белки b-лактоглобулины в буферном растворе с рН=8,6, если при рН=5,2 белок остается на старте?

7. В какой среде необходимо прокипятить сыворотку крови для полного удаления белков, если ИЭТ белков крови меняется от 4,5 до 6,0?

8. Какие реактивы необходимо использовать:

а) для получения безбелкового фильтрата крови;

б) для выделения белков для дальнейшего изучения структуры белков.

9. Имеются следующие реактивы: сульфосалициловая кислота, конц.H2SO4 , крист. (NH4)2SO4, трихлоруксусная кислота, насыщ. раствор хлорида натрия. Объясните выбор растворов и механизм осаждения в каждом случае.

10. ИЭТ гемоглобина рН = 6,68. Белок поместили в буферный раствор с концентрацией ионов водорода 10-6 моль/л. Определите направление движения молекул гемоглобина при электрофорезе. Известно, что рН в эритроцитах равен 7,25. Какой заряд имеют белковые молекулы гемоглобина при этом значении рН?

11. К какому электроду будут передвигаться частицы белка (ИЭТ = 4,0) при электрофорезе в ацетатном буфере, приготовленном из 100 мл раствора ацетата натрия с концентрацией 0,1 моль/л и 50 мл раствора уксусной кислоты с концентрацией 0,2 моль/л? (рКкислоты=4,76)

Тестовые задания