Качественная реакция на гемоглобин

Качественное определение гемоглобина

Количественное определение гемоглобина

Определение количества гемоглобина в крови производится колориметрическим путем. Простейший тип – гемометр.

Принцип действия.

Гемоглобин крови под действием децинормального раствора соляной кислоты превращается в солянокислый гематин. Полученный раствор бурого цвета разбавляется в градуированной пробирке водой до совпадения его цвета с цветом стандартов гемометра. Количество гемоглобина отсчитывается по уровню разбавленного раствора в градуированной пробирке согласно делению шкалы прибора.

Конструкция гемометра.

Гемометр состоит из корпуса стойки с тремя смотровыми окошками. Снизу корпус закрывается крышкой, привинчивающейся двумя винтами. В два гнезда снизу вставляются одинаковые запаянные пробирки со стандартной жидкостью и закрываются крышкой. В среднее гнездо вставляется градуированная пробирка. Цвет жидкости заполненных пробирок-стандартов установлен соответственно цвету раствора солянокислого гематина, полученного из крови с концентрацией гемоглобина в 17,3г%. В задней стенке корпуса смонтировано прозрачно-матовое или молочного цвета стекло. Состав стандартных жидкостей гемометра: 200мм3 децинормальной соляной кислоты смешивают с 20мм3 крови, а затем объем раствора доводится добавлением дистиллированной воды до 2мл. Гемоглобин крови при этом распадается на белок глобин и гем: последний, соединяясь с соляной кислотой, образует солянокислый гематин, имеющий коричневую окраску. В таком стандартном растворе содержится 17,3г% гемоглобина.

Измерительная пробирка и единицы измерения гемоглобина

Градуированная пробирка гемометра может иметь шкалу: с делением от 2 до 23. которая показывает количество гемоглобина в граммах на 100 мл крови, т.е. концентрация гемоглобина в гр%, по СИ — г/л.

Ход работы.

В градуированную пробирку наливают децинормальный раствор соляной кислоты до метки с цифрой 2 г%. Капиллярной пипеткой набирают 20 мм крови, путем осторожного насасывания через резиновую трубку в мундштук. Обычно кровь насасывают на несколько миллиметров выше круговой метки, вынимают мундштук и обтирают ватой кровь, прилипшую снаружи на кончик пипетки. Столбик крови обычно доводится до метки посредством дотрагивания до кончика пипетки ватой. При этом пипетку необходимо держать горизонтально. Затем пипетку с кровью опускают в градуированную пробирку так, чтобы кончик ее прогрузился в соляную кислоту, и кровь осторожно, не взмучивания жидкости, выдавливается из пипетки. После этого пипетка промывается путем насасывания 2 или 3 раза соляной кислоты из верхнего слоя ее в пробирке. Затем пипетка приподнимается, окончательно освобождается от жидкости выдуванием при прикосновении к стенкам пробирки и осторожно удаляется из пробирки. Полученная смесь крови с соляной кислотой тщательно перемешивается посредством легкого постукивания по дну пробирки. Полученную смесь красновато-бурого цвета оставляют в спокойном состоянии в течение 5 минут, поместив пробирку в корпус гемометра. За это время произойдет образование солянокислого гематина (или гемина). По истечении этого времени жидкость осторожно разбавляют дистиллированной водой (пипеткой) до тех пор, пока не будет одинакового цвета со стандартами. Во время разбавления жидкость в пробирке тщательно перемешивается стеклянной палочкой. Сравнение цветов проводится путем сличения при рассмотрении их при дневном свете на вытянутой руке против окна. Количество гемоглобина отсчитывается после совпадения цвета жидкости с цветом стандартов, причем отсчет производится нижнему мениску жидкости в пробирке.

Количество гемоглобина у животных

Вид животного г/100мл, г% г/л
КРС 9-12 90-120
Лошади 8-14 80-140
Овцы, козы 0-14 100-140
Свиньи 9-11 90-110
Кролики 10,5-12,5 105-125
Собаки 13-16 130-160
Человек: женщины 12-14 120-140
           мужчины 13-16 130-160

Качественное определение гемоглобина

Гемоглобин обладает характерным спектром поглощения, отличающим его от других химических соединений. Спектральный анализ позволяет выяснить наличие в каком-либо растворе гемоглобина или его производных.

Ход работы.

К 10 мл дистиллированной воды в пробирке прибавьте 1-2 капли крови, происходит гемолиз крови (т.е. разрушение эритроцитов, которое сопровождается выходом из них красящего пигмента). Гемолизированная кровь исследуется с помощью карманного спектроскопа на проходящем свете. Если между целью спектроскопа и источником света поместить окрашенную среду (гемолизированная кровь), то окрашенный раствор пропускает не все лучи белого цвета, задерживая некоторые из них. Та часть спектра, лучи которой не пропускаются, представляются наблюдателю в виде темных полос.

В нашем опыте в поле зрения спектра обнаруживаются две полоски поглощения в желто-зеленой части спектра, между фраунгоферовыми Д и Е слева более узкая и справа более широкая, характерные для оксигемоглобина.

Спектр восстановленного гемоглобина имеет одну широкую диффузную полосу поглощения между линиями Д и Е, ближе к линии Д.

Читайте также:  Как пить крапиву при гемоглобине

Спектр метгемоглобина имеет 4 полосы поглощения. Наиболее характерной для метгемоглобина является полоса поглощения в красной части спектра, между линиями С и Д, ближе к С. Две другие полосы между линиями Д и Е, четвертая полоса широкая, расположена в сине-зеленой части спектра.

Спектр поглощения карбоксигемоглобина имеет две полосы поглощения, сходные с полосами поглощения оксигемоглобина, но полосы несколько сдвинуты к фиолетовой части спектра.

Источник

Гемоглобин

ВАЖНО!

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Напоминаем вам, что самостоятельная интерпретация результатов недопустима, приведенная ниже информация носит исключительно справочный характер

Гемоглобин: показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов и показатели нормы.

Показание к назначению исследования

Гемоглобин – сложный белок, основной компонент эритроцитов, переносящий кислород от легких ко всем тканям организма и участвующий в выведении углекислого газа из клеток организма.

Молекула гемоглобина состоит из гема (небелковой части) и глобина (белковой части, которая содержит в своей молекуле четыре полипептидные цепи: две альфа-цепи и две бета-цепи). К каждой из четырех глобиновых субъединиц прикреплена группа гема с атомом железа.

Гемоглобин_молекула.jpg
В норме в крови можно обнаружить несколько форм гемоглобина, отличающихся друг от друга белковой частью (количественным или качественным составом аминокислот, входящих в состав глобина):

  • эмбриональный (встречается у плода до 2 месяцев внутриутробного развития);
  • фетальный (образуется со 2 месяца внутриутробного развития, циркулирует до рождения, разрушается в первую неделю жизни);
  • зрелый гемоглобин.

При взаимодействии гемоглобина с различными веществами, способными связываться с его активным центром, возникают производные гемоглобина. В зависимости от того, что присоединил гемоглобин, выделяют формы:

  • HbО2 – соединение с кислородом (оксигемоглобин);
  • HbСО2 – гемоглобин с углекислым газом (карбогемоглобин);
  • HbMet – гемоглобин с окисленным железом (метгемоглобин);
  • HbCO – карбоксигемоглобин, образующийся при отравлении угарным газом;
  • HbA1С – гликозилированный гемоглобин при сахарном диабете.

Наряду с нормальными формами гемоглобина могут существовать мутантные или патологические. Известно более 300 форм патологических гемоглобинов.

Наиболее часто находят:

  • HbS – гемоглобин при серповидно-клеточной анемии;
  • гемоглобин Kempsey при полицитемии;
  • гемоглобин Hammersmith и др.

Производные и патологические формы гемоглобина определяют с целью диагностики различных заболеваний и в ходе динамического наблюдения за их течением (например, показатель гликозилированного гемоглобина отражает усредненное содержание глюкозы крови за три предшествующих месяца).

Срок жизни эритроцитов, сухое вещество которых на 90-95% состоит из гемоглобина, составляет 110-120 дней. Разрушение эритроцитов происходит в селезенке, небольшая часть гемоглобина распадается в красном костном мозге и звездчатых клетках печени.

Определение концентрации гемоглобина в рамках исследования клинического анализа крови — один из важнейших диагностических методов. Расчетный показатель, отражающий среднее содержание гемоглобина в 1 клетке (эритроците) используется для дифференциальной диагностики анемий.

Концентрацию гемоглобина определяют в рамках профилактического, диспансерного наблюдения при первичном обследовании с целью выявления заболеваний, при госпитализации в стационары терапевтического и хирургического профилей.

Определение количественного содержания гемоглобина используется в комплексе с другими гематологическими показателями (величиной гематокрита, количеством эритроцитов, эритроцитарными индексами) для диагностики ряда патологических состояний: анемии, эритремии и вторичных эритроцитозов, для оценки степени дегидратации организма, определения тяжести кровопотери при геморрагических состояниях, оценки эффективности гемотрансфузий в процессе терапии, определения тяжести состояния пациента при воспалительных, инфекционных заболеваниях, а также для мониторинга проводимой терапии и течения различных заболеваний.

Подготовка к процедуре

  • Кровь рекомендуется сдавать утром с 8 до 11 часов, натощак (не менее 8 часов голода, пить воду можно в обычном режиме).
  • Сообщите врачу о принимаемых вами лекарственных препаратах.
  • Исключите прием алкоголя накануне исследования, не курите в течение 1 часа до исследования.
  • Исключите физические и эмоциональные перегрузки накануне исследования.
  • После прихода в лабораторию отдохните 10-20 минут перед взятием крови.
  • Нежелательно сдавать кровь для лабораторного исследования вскоре после физиотерапевтических процедур, инструментальных обследований и других медицинских вмешательств.
  • При контроле лабораторных показателей в динамике рекомендуется проводить повторные исследования в одинаковых условиях: в одной лаборатории (тем же методом), примерно в одинаковое время суток и т. п.

Гликированный гемоглобин (HbA1С, Glycated Hemoglobin)

Соединение гемоглобина с глюкозой, позволяющее оценивать уровень гликемии за 1 — 3 месяца, предшествующие исследованию.

Образуется в результате медленного неферментативного присоединения глюкозы к гемоглобину А, содержащемуся в эритроцитах.

Гликированный (употребляется также т…

715 руб

Срок исполнения

1 рабочий день, исключая день взятия биоматериала.

Читайте также:  Норма гемоглобина для операции

Что может повлиять на результат

В случае несоблюдения правил подготовки полученный результат может быть некорректным.

Уровень гемоглобина может быть повышенным после длительного пребывания в высокогорье. Пониженный уровень гемоглобина регистрируется у беременных, вегетарианцев, после нескольких подряд эпизодов сдачи крови.

Сдать анализ крови на гемоглобин можно в ближайшем медицинском офисе ИНВИТРО. Список офисов, где принимается биоматериал для лабораторного исследования, представлен в разделе «Адреса».

Интерпретация результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т. д.

Исследуемый материал: цельная кровь (с ЭДТА).

Единицы измерения: г/дл.

Альтернативные единицы измерения: г/л.

Коэффициент пересчета: г/л х 0,1 ==> г/дл.

Определение концентрации гемоглобина в крови проводят в ходе исследования клинического анализа крови.

  • Анализ крови. Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ) (Complete Blood Count, CBC);
  • Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоформула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при наличии патологических сдвигов);
  • Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоформула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при наличии патологических сдвигов)

    Синонимы: Общий анализ крови, ОАК. Full blood count, FBC, Complete blood count (CBC) with differential white blood cell count. 

    Краткое описание исследования Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоформула, СОЭ
    Кровь — это жидкая ткань, выполняющая различные функции, в том числе, транспорта …

    720 руб

  • Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоформула, СОЭ (с обязательной «ручной» микроскопией мазка крови);
  • Нормальные показатели

    Дети

    Возраст Показатель гемоглобина, г/дл
    1 день — 14 дней 13,4 — 19,8
    14 дней — 4,3 недели 10,7 — 17,1
    4,3 недели — 8,6 недель 9,4 — 13,0
    8,6 недель — 4 месяца 10,3 — 14,1
    4 месяца — 6 месяцев 11,1 — 14,1
    6 месяцев — 9 месяцев 11,4 — 14,0
    9 месяцев-12 месяцев 11,3 — 14,1
    12 месяцев – 5 лет 11,0 — 14,0
    5 лет — 10 лет 11,5 — 14,5
    10 лет — 12 лет 12,0 — 15,0

    Возраст Показатель гемоглобина, г/дл
      Девушки Юноши
    12 лет — 15 лет 11,5 — 15,0 12,0 — 16,0
    15 лет — 18 лет 11,7 — 15,3 11,7 — 16,6

    Взрослые

    Возраст Женщины Мужчины
    18 лет — 45 лет 11,7 — 15,5 13,2 — 17,3
    45 лет — 65 лет 11,7 — 16,0 13,1 — 17,2
    > 65 лет 11,7-16,1 12,6-17,4

    Расшифровка показателей

    Гемоглобин у новорожденных выше, чем у взрослых. В течение первого года жизни происходит его постепенное снижение, а затем уровень гемоглобина опять возрастает. В норме показатель гемоглобина у женщин ниже, чем у мужчин.

    Что значат пониженные результаты

    1. Снижение гемоглобина может свидетельствовать об анемии, развивающейся в результате различных причин (острых и хронических кровопотерь; недостатка фолиевой кислоты, витамина В12, железа; неполноценного питания; поражения костного мозга с угнетением его функции; нарушения регуляции образования эритроцитов при уменьшении продукции гормона, стимулирующего рост и размножение эритроцитов; повышенного разрушения эритроцитов под воздействием различных причин или генетических дефектов; хронических воспалительных, инфекционных заболеваний).
    2. Еще одна причина падения уровня гемоглобина — гипергидратация (избыточное содержание воды в организме).

    Что значат повышенные результаты

    1. Повышение уровня гемоглобина регистрируется при обезвоживании, вызванном острой диареей, многократной рвотой, повышенным потоотделением, диабетом, обширными ожогами.
    2. Физиологические эритроцитозы отмечаются у жителей высокогорья, летчиков, спортсменов.
    3. Симптоматические эритроцитозы диагностируются при дыхательной и/или сердечно-сосудистой недостаточности, поликистозе почек, а также у курильщиков.
    4. Для эритремии (разновидность хронического лейкоза), онкологических заболеваний также характерно снижение уровня гемоглобина.
    5. К снижению гемоглобина приводит передозировка или неправильное применение препаратов рекомбинантного эритропоэтина.

    Дополнительное обследование при отклонении от нормы

    При отклонении от нормы концентрации гемоглобина в крови может быть назначено дополнительное обследование.

    С целью диагностики анемии:

    • ретикулоциты;

    Ретикулоциты (Reticulocytes)

    Синонимы: Количество ретикулоцитов; Подсчет количества ретикулоцитов; Ретикулоцитарный индекс. 

    Retic count; Reticulocyte index; Corrected reticulocyte; Reticulocyte count.

    Краткое описание исследования «Ретикулоциты» 

    Непосредственные предшественники зрелых эритроцитов. Это …

    365 руб

  • тромбоциты, микроскопия (подсчет в окрашенном мазке по методу Фонио);
  • Тромбоциты, микроскопия (подсчет в окрашенном мазке по методу Фонио)

    Синонимы: Тромбоциты, микроскопия (метод Фонио).  

    Manual Platelet Count (PLT count): Indirect Method by Fonio. 

    Краткое описание теста «Тромбоциты, микроскопия (подсчет в окрашенном мазке по методу Фонио)»  

    Читайте также:  Чем лечить высокий гемоглобин в крови

    Подсчет тромбоцитов входит в состав общего анализа крови и обычно пр…

    260 руб

    Эритропоэтин (Erythropoetin)

    Важнейший регулятор эритропоэза.

    Эритропоэтин – гликопротеиновый гормон, вызывающий повышение продукции эритроцитов. У взрослого человека он образуется преимущественно в почках, а в эмбриональном периоде практически полностью — в печени плода. Уменьшение содержания доступного кислоро…

    1 435 руб

    Трансферрин (Сидерофилин, Transferrin)

    Синонимы: Переносчик железа; Сидерофилин. 

    Siderophilin,Transferrin; Tf.

    Краткая характеристика определяемого вещества Трансферрин 

    Плазменный белок, гликопротеин – основной переносчик железа. Синтез трансферрина осуществляется в печени и зависит от функционального состояния печени…

    680 руб

  • латентная (ненасыщенная) железосвязывающая способность сыворотки крови;
  • Железо сыворотки (Fe serum, Iron serum)

    Синонимы: Железо сывороточное. Serum Iron, Serum Fe, Iron, Fe. 

    Краткая характеристика определяемого вещества (Железо сыворотки крови)
    Жизненно важный микроэлемент, участвующий в процессе связывания, переноса и передачи кислорода в ткани и в процессах тканевого дыхания. 

    Железо входит в состав …

    315 руб

    Фолиевая кислота (Folic Acid)

    Синонимы: Витамин В9, фолацин, птериолглутаминовая кислота. Vitamin B9, vitamin Bc, folic acid, folacin, pteroylglutamic acid.

    Витамин, необходимый для нормального гемопоэза (кроветворения).

    Краткая характеристика определяемого вещества Фолиевая кислота

    1 040 руб

    С целью диагностика заболеваний желудочно-кишечного тракта:

    • анализ кала на простейшие;

    Анализ кала на простейшие (PRO stool)

    Наибольшее значение имеет обнаружение в кале следующих простейших (intestinal protozoa), вызывающих заболевания у человека:

    Entamoeba Histolytica (дизентерийная амеба) вызывает амёбиаз. Встречается в кишечнике человека в двух формах. Тканевая форма вызывает изъязвление стенок кишечника. Нали…

    495 руб

    Анализ на энтеробиоз (яйца остриц, enterobiasis), тампон

    Энтеробиоз — гельминтоз, клиническими проявлениями которого являются перианальный зуд и кишечные расстройства.

    Возбудитель — острица (Enterobius vermicularis или Охуuris vermicularis). Это мелкая нематода, которая обитает в толстом кишечнике, а выползая из прямой кишки, откладывает яйца…

    460 руб

    Обследования, направленные на выявление поражений внутренних органов:

    • оценка показателей работы почек (мочевина, креатинин, клубочковая фильтрация);

    Креатинин (в крови) (Creatinine)

    Синонимы: Сывороточный креатинин; Креатинин сыворотки (с расчетом СКФ); 1-метилгликоциамидин. 

    Creatinine; Creat; Cre; Blood creatinine; Serum creatinine; Serum Creat. 

    Краткое описание определяемого аналита Креатинин 

    Азотистый метаболит, конечный продукт превращения креатинфосф…

    310 руб

    Мочевина (в крови) (Urea)

    Синонимы: Диамид угольной кислоты, карбамид, мочевина в крови. Urea nitrogen, Urea, Blood Urea Nitrogen (BUN), Urea, Plasma Urea.

    Краткая характеристика определяемого вещества Мочевина  

    Главный конечный продукт белкового обмена. Около 50% остаточного азота (небелковые азотсодержа…

    310 руб

  • оценка показателей работы печени (билирубин, АЛТ, АСТ);
  • Билирубин прямой (Билирубин конъюгированный, связанный; Bilirubin direct)

    Синонимы: Прямой билирубин; конъюгированный билирубин; связанный билирубин. Direct bilirubin, Conjugated bilirubin. 

    Краткая характеристика определяемого вещества Билирубин прямой 
    Фракция общего билирубина крови, образующаяся в результате процессов конъюгирования свободного билирубина в печени. …

    310 руб

  • ультразвуковое исследование органов ЖКТ.
  • Источники:

    1. Хиггинс К. Расшифровка клинических лабораторных анализов. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2010. – 456 с.
    2. Дементьева И.И., Чарная М.А., Морозов Ю.А. Анемии: руководство. – М.: ГЭОТАР – Медиа, 2013. – 304 с.

    ВАЖНО!

    Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

    Информация проверена экспертом

    Качественная реакция на гемоглобин

    Лишова Екатерина Александровна

    Высшее медицинское образование, опыт работы — 19 лет

    Поделитесь этой статьей сейчас

    Похожие статьи

    Клинический анализ крови

    Клинический анализ крови: показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов и показатели нормы.

    Микроэлементы промо

    В организме человека 86 микроэлементов. Часть из них называют структурными, так как они составляют 99% элементного состава человеческого организма. К ним относятся: углерод, кислород, водород, азот, кальций, магний, натрий, калий, хлор, фосфор, сера, железо.

    Железо — жизненно важный микроэлемент

    Метаболизм железа меняется при ряде физиологических и патологических состояний – в том числе, активном росте, беременности, различных эндокринных сдвигах, воспалении, инфекционных болезнях.

    Источник