Смд анализ на гемоглобин

Гемоглобин – металлопротеин, белок, содержащий гем. Гемоглобин составляет около 98% белков, содержащихся в цитоплазме эритроцита. Основная функция гемоглобина – перенос кислорода.

Структура гемоглобина определяет способность переноса кислорода эритроцитами. К 4–6 месяцам жизни ребенка происходит замена фетального гемоглобина на взрослую форму. В норме в крови взрослого человека фетальный гемоглобин составляет не более 1%. Фетальный гемоглобин обладает повышенным сродством к кислороду и сниженным ответом на регулятор передачи кислорода к тканям, 2,3 дифосфоглицерат. Поэтому увеличенное содержание фетального гемоглобина у взрослого человека приводит к недостаточному поступлению кислорода к тканям, т. е. гипоксии.

Изменение структуры гемоглобина (гемоглобинопатии) приводит к нарушению связывания с кислородом, необратимому связыванию гемоглобина с углекислым газом и, последовательно, изменению формы эритроцитов от двояковогнутого эластичного диска до искаженных жестких структур.

Кроме оценки форм и концентрации гемоглобина представляет интерес определение фракций гемоглобина, связанного не только с кислородом, но и другими газами.

Способность крови (эритроцитов) транспортировать кислород к тканям за счет формирования оксигемоглобина может существенно снижаться при вдыхании продуктов горения углерода, серы, ингаляцией оксидом азота которые вступают в необратимое соединение с гемоглобином, образуя дисгемоглобины, и препятствуя формированию оксигемоглобина. В нормальных условиях кислородпереносящая фракция гемоглобина, О2-Hb составляет 95–99%. В этой фракции гемоглобин находится в обратимой связи с кислородом, в окисленном состоянии Fe2+. Небольшой процент (до 1–2%) восстановленного гемоглобина +H+Hb всегда присутствует в крови. Его количество резко возрастает при гемолизе эритроцитов.

В патологических фракциях дисгемоглобинов (метгемоглобин, сульфгемоглобин, карбоксигемоглобин) железо гемоглобина переходит в более окисленную форму (Fe3+), не способную связывать и переносить кислород. В нормальных условиях фракция дисгемоглобинов составляет не более 1,5% общего гемоглобина. Причиной значительного повышения фракции карбоксигемоглобина (до 10%) является курение.

В развернутом клиническом анализе крови может встречаться показатель среднего содержания гемоглобина в эритроците (MCH и MCHC).

Метод исследования

Определение формы гемоглобина и выявление гемоглобинопатий возможно с помощью электрофореза.

Определение концентрации гемоглобина (общий гемоглобин, tHb) выполняется различными методами. Принцип определения гемоглобина заключается в лизисе эритроцитов пробы и последующей обработке реактивом, дающим окраску в комплексе с гемоглобином. Референтным методом определения гемоглобина является гемоглобинцианидный.

Интерпретация результатов исследования

При оценке уровня гемоглобина следует помнить:

• суточные колебания концентрации гемоглобина в периферической крови достигают 15% с максимальными значениями в утренние часы;
• длительное наложение жгута при взятии крови и плохо перемешанная проба крови приводят к получению неверных результатов.

Повышенные значения

• Сгущение крови, вызванное дегидратацией (неукротимая рвота, полиурия, диарея, малое потреблении жидкости в жаркое время);
• эритремия (полицитемия), симптоматические реактивные эритроцитозы;
• длительное пребывание на больших высотах;
• гипертриглицеридемия, лейкоцитоз (выше 25,0109/л), наличие в крови парапротеинов.

Пониженные значения

• Анемии различной этиологии;
• анемия хронических заболеваний;
• перенесенные кровопотери;
• злокачественные новообразования;
• нарушение синтетической функции печени.

Гликированный (гликозилированный) гемоглобин представляет собой стабильное соединение гемоглобина с глюкозой, которое образуется в результате неферментативного гликозилирования гемоглобина. Гликированные формы гемоглобина представлены фракцией HbA1 (HbA1a+HbA1b+HbA1c), в которой 80% составляет гемоглобин HbA1c.

Повышение уровня гликированного гемоглобина отражает гипергликемию, которая имела место в период времени, равный продолжительности жизни эритроцита (от 30 до 120 суток; в среднем 60 суток для большей части эритроцитов), т. е. уровень гликированного гемоглобина отражает средний уровень глюкозы на протяжении предшествующих 6–8 недель.

Предложенные в настоящее время методы определения выявляют разные субфракции гемоглобина: одни измеряют HbA1, другие – HbA1c, третьи – тотальный гликогемоглобин (GHb). Содержание гликированного гемоглобина принято представлять в процентах от концентрации общего гемоглобина у пациента. Референтные интервалы для оценки содержания гликированного гемоглобина, приведенные в литературе и инструкциях к наборам реагентов разных производителей, варьируют в зависимости от типа метода (иммунохимический, ионообменная или аффинная хроматография, высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)). В качестве референтного метода международными профессиональными организациями выбран метод ВЭЖХ.

Ложное повышение результатов определения гликированного гемоглобина может быть получено в случаях присутствия у пациента патологических фракций гемоглобина (HbS, HbC и др.), повышенного содержания фетального гемоглобина HbF, и железодефицитных состояний, не сопровождающихся анемией. При железодефицитной анемии, потере большого количества крови, укорочении времени жизни эритроцитов, гемофилии, наличии карбамилированного гемоглобина (у пациентов с уремией) получают ложно заниженный уровень HbA1c. У больных СД с хронической почечной недостаточностью уровень HbA1C снижен из-за почечной анемии и не может характеризовать гликемию. Таким больным рекомендовано следить за уровнем гликемии, определяя концентрацию в крови фруктозамина.

Показания к исследованию

• Диагностика СД;
• контроль гипергликемии и мониторинг эффективности терапии сахарного диабета 1 и 2 типа;
• беременность.

Особенности взятия и хранения образца. Цельная кровь с антикоагулянтом.

Результат исследования не зависит от приема пищи, физических нагрузок, психоэмоционального состояния пациента и других факторов, влияющих на содержание глюкозы в крови. Взятие крови может проводиться в любое время суток.

Метод исследования. Концентрацию гликированного гемоглобина в крови предпочтительно определять референтным методом ВЭЖХ.

Повышенные значения

• СД 1 и 2 типа;
• диабет беременных;
• вторичный СД;
• нарушение толерантности к глюкозе;
• железодефицитные состояния, не сопровождающиеся анемией;
• повышенное содержание фетального гемоглобина или патологических форм гемоглобина HbS, HbC и др.

Пониженные значения

• потеря большого количества крови;
• укорочение времени жизни эритроцитов;
• гемолитическая болезнь;
• наличие карбамилированного гемоглобина (у пациентов с уремией);
• железодефицитная анемия.